本發(fā)明涉及生物檢測，具體地，涉及一種核酸恒溫擴增和檢測裝置及其使用方法。

背景技術：

1、核酸恒溫擴增檢測技術無需精密儀器控制升溫降溫循環(huán)，在恒定的溫度下較短時間就可以完成擴增，利用焦磷酸酶沉淀或者聯(lián)合膠體金免疫層析技術形成裸眼可視的結果。目前已有在農牧漁養(yǎng)殖病原體感染和環(huán)境水體致病菌污染等的現(xiàn)場檢測。

2、現(xiàn)有公開號為cn117025729a的中國專利，其公開了基于核酸試紙條的核酸檢測裝置及核酸檢測方法，包括：檢測試劑收容組件，檢測試劑收容組件形成密封腔室，且形成的密封腔室具有薄弱膜；檢測卡，所述檢測卡包括殼體和核酸檢測試紙條；所述殼體還設有待測試劑滴入口，所述殼體設置有結合部；還包括頂針，所述頂針可刺穿薄弱膜。

3、常規(guī)核酸恒溫擴增可視化檢測技術時采用和核酸恒溫擴增技術和層析試紙條聯(lián)合檢測的方法，待核酸恒溫擴增完成后，通過切割、刺破擴增試劑管等方式，將擴增產(chǎn)物釋放至層析試紙條底端后進行反應，試紙條裝載在常規(guī)的塑料卡殼中，觀察視窗為開放空間或者半開放空間，容易造成起氣溶膠污染和實驗室污染。

4、現(xiàn)有公開號為cn113512490b的中國專利，其公開了一種自驅動微流控檢測裝置及其用途，裝置包括：上蓋，固定于上蓋下的底板，設置于上蓋和底板之間的夾層，設置于上蓋上的加樣孔，連接于加樣孔的微流控導流組件，設置于夾層上并位置對應于微流控導流組件的加樣槽，設置于夾層上并連接于微流控導流組件的功能腔室，連接于微流控導流組件的層析試紙；微流控導流組件包括：毛細管導流渠，連接于毛細管導流渠并控制毛細管導流渠的聯(lián)通和斷開的通斷連接器。

5、現(xiàn)有技術中，核酸恒溫擴增體系反應體積一般為20-50μl，產(chǎn)物能進行的試紙條測試受體積限制僅能完成1個，無法進行多個項目聯(lián)合測試，若需要同時多個試紙條進行測試反應，需要增加稀釋液將擴增產(chǎn)物沖至試紙條底端進行層析反應，由于核酸擴增體積一般為20-50μl，層析稀釋液用量一般為80-120μl，稀釋液較多有可能漫過擴增產(chǎn)物，無法混勻，或者混勻不充分或引起靈敏度下降。

6、因此，需要提供一種密封的、可實現(xiàn)稀釋液和擴增產(chǎn)物混勻的多聯(lián)核酸恒溫擴增可視化檢測裝置，保證核酸恒溫擴增的均一性和擴增效率，并且能夠減少外界對核酸恒溫擴增的污染和檢測試劑產(chǎn)生高溶度擴增產(chǎn)物帶來的氣溶膠污染環(huán)境，可進行重復使用，從而降低測試成本、避免資源浪費和輸出電子垃圾，相對綠色環(huán)保。

技術實現(xiàn)思路

1、針對現(xiàn)有技術中的缺陷，本發(fā)明的目的是提供一種核酸恒溫擴增和檢測裝置及其使用方法。

2、根據(jù)本發(fā)明提供的一種核酸恒溫擴增和檢測裝置,包括：恒溫控制底座和試劑反應管，所述恒溫控制底座上設置有加熱座，所述加熱座的頂端安裝有恒溫棒，所述加熱座插設在試劑反應管內部；

3、所述試劑反應管包括：試劑管和試劑蓋，所述試劑蓋緊固安裝在試劑管的頂部，所述試劑蓋包括內凹型試劑蓋，所述試劑蓋的中部由上至下依次設置有：硅膠蓋、濾芯以及環(huán)形的圓孔篩出口，所述圓孔篩出口的中心處設置有圓球形凸起；

4、所述試劑管的中部設置有核酸恒溫擴增區(qū)域，所述核酸恒溫擴增區(qū)域的周側設置有多個試劑條插槽，所述核酸恒溫擴增區(qū)域包括中心的圓錐型凸起和環(huán)形的恒溫反應池，所述圓孔篩出口與恒溫反應池對應設置，所述恒溫反應池與加熱座貼合設置，所述恒溫反應池的周側設置有多個溢流道，所述恒溫反應池通過交錯溢流口分別與多個溢流道連通，所述溢流道與試劑條插槽一一對應連通。

5、優(yōu)選地，所述恒溫控制底座包括外殼，所述外殼包括設置在中部的呈圓柱形的加熱座，還包括與所述試劑反應管不接觸的操控區(qū)域，所述操控區(qū)域的表面設置有l(wèi)ed顯示屏、一個或多個按鍵開關，所述外殼的內部安裝有電池和電路板，所述外殼上安裝有蜂鳴提醒器，所述電路板分別與蜂鳴提醒器、led顯示屏、按鍵開關電連接。

6、優(yōu)選地，所述恒溫棒內部安裝有加熱管，所述加熱管與電路板電連接，所述加熱管與圓錐型凸起對應設置。

7、優(yōu)選地，所述試劑管包括透明的圓柱筒體，所述試劑管和試劑蓋通過螺旋咬合連接或粘合連接。

8、優(yōu)選地，所述試劑蓋的中部形成有加樣口，所述硅膠蓋安裝在試劑蓋上且密封加樣口，所述硅膠蓋的中部設置有十字開口或者三角開口的加樣孔，所述加樣孔與加樣口連通。

9、優(yōu)選地，所述濾芯與硅膠蓋之間形成有加樣腔，所述濾芯與圓孔篩出口之間形成有過濾腔，所述過濾腔通過圓孔篩出口與恒溫反應池連通。

10、優(yōu)選地，所述恒溫反應池內放置有核酸擴增凍干粉試劑，所述圓球形凸起與圓錐型凸起對應設置且二者的尺寸相匹配。

11、優(yōu)選地，多個所述試劑條插槽沿試劑反應管的周向均勻設置，所述溢流道與試劑條插槽一一對應設置，所述恒溫反應池的周側均勻設置有多個交錯溢流口，所述交錯溢流口包括雙層擋板，所述交錯溢流口的內層擋板、外層擋板的流通通道、溢流道的入口三者由內至外一一對應設置。

12、優(yōu)選地，所述溢流道的末端設置有隔板插槽，所述隔板插槽內部插設有隔板，所述試劑條插槽通過隔板分隔為底部連通的內外兩層，試劑條插設在所述隔板的外側，所述溢流道與隔板的內側連通。

13、根據(jù)本發(fā)明提供的一種核酸恒溫擴增和檢測裝置的使用方法，采用上述的核酸恒溫擴增和檢測裝置，包括以下步驟：

14、步驟s1，打開恒溫控制底座的電源，將試劑反應管安裝在恒溫控制底座上；

15、步驟s2，采集樣本，在核酸裂解液中進行洗脫；

16、步驟s3，取核酸裂解液，在硅膠蓋的加樣孔處加入待測核酸裂解液；

17、步驟s4，點擊開始測試按鈕，恒溫控制底座進行預設時長的恒溫加熱孵育；

18、步驟s5，倒計時完成核酸恒溫擴增，蜂鳴提醒器提示進行下一步，加入稀釋液，進行試紙條測試，通過透明視窗觀看到試紙條層析結果。

19、與現(xiàn)有技術相比，本發(fā)明具有如下的有益效果：

20、1、本發(fā)明通過采用試劑蓋中部的濾芯和底部的圓孔篩出口，可以減緩稀釋液進入恒溫反應池的速度，避免稀釋液直接溢出；通過采用交錯溢流口的結構，液體被交錯溢流口凸起部分攔截與后面行進液體混合，從而完成擴增產(chǎn)物與稀釋液的混勻，解決了擴增產(chǎn)物稀釋混勻問題由于稀釋液體積較大，擴增體積較少引起的無法重復混勻的問題。

21、2、本發(fā)明通過采用圓球形凸起、恒溫反應池和反應池中間的圓錐型凸起的結構，將待測核酸裂解液均勻地分散在周圍，保證反應體系的均一性，將反應區(qū)域均勻地分布在周圍；通過采用硅膠蓋、濾芯以及過濾腔形成密封層等，從而減少外界對核酸恒溫擴增的污染和檢測試劑產(chǎn)生高濃度擴增產(chǎn)物帶來的氣溶膠污染環(huán)境；環(huán)形恒溫反應池的結構也可避免由于加熱棒中心過熱影響酶的活性，從而保證核酸恒溫擴增的均一性和擴增效率。

22、3、本發(fā)明通過將核酸恒溫擴增分為恒溫控制底座和試劑反應管兩個部分，恒溫控制底座安裝有可充電鋰電池，可進行重復使用，從而降低測試成本、避免資源浪費和輸出電子垃圾，相對綠色環(huán)保；在恒溫控制底座中增加溫度控制模塊，時間控制模塊和蜂鳴器模塊，從而保證試劑在恒定的溫度范圍內和恒定的時間進行核酸擴增，保證擴增效率和實驗間結果的一致性，可有效提醒用戶試劑反應流程和及時進行結果判讀，避免遺忘進行中的測試。