本公開屬于化妝品原料，具體涉及一種三七-蟬擬青霉溶胞產(chǎn)物水提物及其制備方法、應(yīng)用。
背景技術(shù)：
1、蟬擬青霉(paecilomyces?cicadae)是中藥蟬花(cordyceps?cicadae)的無性型時(shí)期，是一種藥食用真菌。其活性物質(zhì)具有抗氧化、抗炎、抗腫瘤、免疫調(diào)節(jié)等作用，有很高的藥用價(jià)值，具有較好的應(yīng)用開發(fā)前景。三七(panax?notoginseng(burkill)f.h.chen?exc.h.chow)是五加科人參屬多年生草本植物。三七是我國傳統(tǒng)的珍貴中草藥，具有抗炎、抗衰老和免疫調(diào)節(jié)等功效。目前市場上還期待性能更好的蟬花提取物問世。
技術(shù)實(shí)現(xiàn)思路
1、在下文中給出了關(guān)于本公開的簡要概述，以便提供關(guān)于本公開的某些方面的基本理解。應(yīng)當(dāng)理解，這個(gè)概述并不是關(guān)于本公開的窮舉性概述。它并不意圖確定本公開的關(guān)鍵或重要部分，也不意圖限定本公開的范圍。其目的僅僅是以簡化的形式給出某些概念，以此作為稍后論述的更詳細(xì)描述的前序。
2、為解決上述技術(shù)問題，本公開提供的技術(shù)方案是：
3、第一方面，本公開提供一種三七-蟬擬青霉溶胞產(chǎn)物水提物的制備方法，包括：
4、三七-蟬擬青霉菌絲體制備步驟：將三七根須粉和水混合均勻，滅菌，得到三七液體培養(yǎng)基；將蟬擬青霉種子液接入所述三七液體培養(yǎng)基中發(fā)酵處理；發(fā)酵完成后，離心得菌絲體，烘干，粉碎制成菌絲體粉末。
5、水提物制備步驟：將所述菌絲體粉末在恒溫水浴條件下進(jìn)行水提取處理，然后離心取上清液，冷卻后經(jīng)凍干、粉碎、研磨處理，得到三七-蟬擬青霉溶胞產(chǎn)物水提物的凍干粉。
6、上述三七-蟬擬青霉溶胞產(chǎn)物水提物的制備方法，作為一種優(yōu)選實(shí)施方式，所述三七-蟬擬青霉菌絲體制備步驟中，三七液體培養(yǎng)基中三七根須粉占0.5-2wt％，優(yōu)選為1wt％。
7、上述三七-蟬擬青霉溶胞產(chǎn)物水提物的制備方法，作為一種優(yōu)選實(shí)施方式，所述三七-蟬擬青霉菌絲體制備步驟中，所述滅菌的條件為118-125℃，25-35min，優(yōu)選為121℃，30min。
8、上述三七-蟬擬青霉溶胞產(chǎn)物水提物的制備方法，作為一種優(yōu)選實(shí)施方式，所述三七-蟬擬青霉菌絲體制備步驟中，所述蟬擬青霉為蟬花(cordyceps?cicadae)ch2347，其保藏編號為cgmcc?no.40399；更優(yōu)選地，所述蟬擬青霉種子液中蟬擬青霉菌絲體體積占比為整個(gè)液體培養(yǎng)基的50～80％；進(jìn)一步優(yōu)選地，所述蟬擬青霉種子液與所述三七液體培養(yǎng)基的體積比為3-7％，優(yōu)選為5％；更進(jìn)一步地，所述蟬擬青霉種子液的制備方法包括：(1)將生長在pda平板中的蟬花ch2347菌種接種到馬鈴薯葡萄糖水培養(yǎng)基中，接種比例為直徑約0.5cm的固體菌種2～3個(gè)：300ml培養(yǎng)基，于28℃下180rpm培養(yǎng)3天；(2)將步驟(1)的培養(yǎng)物經(jīng)勻漿處理后，繼續(xù)作為種子液接種至新的馬鈴薯葡萄糖水培養(yǎng)基中，接種體積比為1:15，于28℃下180rpm培養(yǎng)4天，獲得所述蟬擬青霉種子液。
9、上述三七-蟬擬青霉溶胞產(chǎn)物水提物的制備方法，作為一種優(yōu)選實(shí)施方式，所述三七-蟬擬青霉菌絲體制備步驟中，所述發(fā)酵條件為26-30℃發(fā)酵4-6天，優(yōu)選為28℃發(fā)酵4-5天；更優(yōu)選地，所述發(fā)酵在搖床上進(jìn)行，所述搖床轉(zhuǎn)速為160-200rpm，進(jìn)一步優(yōu)選為180rpm。
10、上述三七-蟬擬青霉溶胞產(chǎn)物水提物的制備方法，作為一種優(yōu)選實(shí)施方式，所述三七-蟬擬青霉菌絲體制備步驟中，所述離心的條件為4500-5000rpm，25-35min；優(yōu)選為4800rpm，30min；和/或，所述烘干的溫度為35-45℃。
11、上述三七-蟬擬青霉溶胞產(chǎn)物水提物的制備方法，作為一種優(yōu)選實(shí)施方式，所述三七-蟬擬青霉菌絲體制備步驟中，所述菌絲體粉末的粒徑為200μm以下，優(yōu)選為177μm以下；和/或，所述菌絲體粉末與蒸餾水的質(zhì)量比為0.5-2:10，優(yōu)選為1:10。
12、上述三七-蟬擬青霉溶胞產(chǎn)物水提物的制備方法，作為一種優(yōu)選實(shí)施方式，所述水提物制備步驟中，所述恒溫水浴條件為溫度60-80℃，提取時(shí)間1.5-2.5h，優(yōu)選為70℃恒溫水浴中提取2h；和/或，所述離心的條件為3500-5000r/min，8-15min，優(yōu)選為4000r/min，10min。
13、第二方面，本公開提供一種三七-蟬擬青霉溶胞產(chǎn)物水提物，根據(jù)上述制備方法制成。
14、第三方面，本公開提供一種三七-蟬擬青霉溶胞產(chǎn)物水提物在制備皮膚外用劑、發(fā)用劑方面的應(yīng)用；優(yōu)選地，所述三七-蟬擬青霉溶胞產(chǎn)物水提物作為所述皮膚外用劑中的抗氧化活性成分和抗炎活性成分中至少一種；優(yōu)選地，所述皮膚外用劑為護(hù)膚水、乳、面霜、面膜中的至少一種。
15、相比于現(xiàn)有技術(shù)，本公開的有益效果包括但不限于：
16、1、本公開提供了一種基于菌絲體代謝途徑，誘導(dǎo)增強(qiáng)抗氧化、抗炎功效的三七-蟬擬青霉溶胞產(chǎn)物水提物及其制備方法；
17、2、本公開基于活性成分含量、抗炎功效和抗氧化功效評價(jià)、非靶向代謝組學(xué)分析三個(gè)層面，探究三七對蟬擬青霉溶胞產(chǎn)物成分功能及化妝品功效的影響。結(jié)果表明，添加三七后發(fā)酵的蟬擬青霉溶胞產(chǎn)物(sq-ch)中總糖、還原糖、蛋白的含量較低，但β-葡聚糖和糖醛酸的含量較高；在自由基清除能力方面，sq-ch的dpph自由基清除能力較強(qiáng)，呈現(xiàn)出濃度依賴性。經(jīng)uvb損傷后，sq-ch組的hacat細(xì)胞培養(yǎng)液中，il-1β、tnf-α炎癥因子含量明顯降低，表明添加三七發(fā)酵蟬擬青霉對il-1β和tnf-α有著極顯著的抑制作用，表現(xiàn)出較強(qiáng)的抗炎功效。而經(jīng)uva損傷后，sq-ch組的hsf細(xì)胞中的mmp-1、mmp-9含量相較模型組明顯降低，說明添加三七發(fā)酵蟬擬青霉對mmp-9的有較強(qiáng)的抑制能力，表現(xiàn)出較強(qiáng)的抗氧化功效。菌體可能面臨外界環(huán)境的壓力誘導(dǎo)菌絲體內(nèi)部代謝途徑的調(diào)整，減少糖類代謝，轉(zhuǎn)向以氨基酸為主要能源或調(diào)節(jié)代謝的方向，使氨基酸類代謝物質(zhì)增多，增強(qiáng)抗氧化抗炎功效。由以上數(shù)據(jù)可知，添加三七之后，提高了溶胞產(chǎn)物的抗炎、抗氧化的功效，為以后蟬擬青霉溶胞產(chǎn)物的開發(fā)應(yīng)用提供了思路。
1.一種三七-蟬擬青霉溶胞產(chǎn)物水提物的制備方法，其特征在于，包括：
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的三七-蟬擬青霉溶胞產(chǎn)物水提物的制備方法，其特征在于，所述三七-蟬擬青霉菌絲體制備步驟中，所述三七液體培養(yǎng)基中所述三七根須粉占0.5-2wt％，優(yōu)選為1wt％；和/或，
3.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的三七-蟬擬青霉溶胞產(chǎn)物水提物的制備方法，其特征在于，所述三七-蟬擬青霉菌絲體制備步驟中，所述三七-蟬擬青霉菌絲體制備步驟中，所述蟬擬青霉為蟬花(cordyceps?cicadae)ch2347，其保藏編號為cgmcc?no.40399；
4.根據(jù)權(quán)利要求1-3中任一項(xiàng)所述的三七-蟬擬青霉溶胞產(chǎn)物水提物的制備方法，其特征在于，所述三七-蟬擬青霉菌絲體制備步驟中，所述發(fā)酵條件為26-30℃發(fā)酵4-6天，優(yōu)選為28℃發(fā)酵4-5天；更優(yōu)選地，所述發(fā)酵在搖床上進(jìn)行，所述搖床轉(zhuǎn)速為160-200rpm，進(jìn)一步優(yōu)選為180rpm。
5.根據(jù)權(quán)利要求1-4中任一項(xiàng)所述的三七-蟬擬青霉溶胞產(chǎn)物水提物的制備方法，其特征在于，所述三七-蟬擬青霉菌絲體制備步驟中，所述離心的條件為4500-5000rpm，25-35min；優(yōu)選為4800rpm，30min；和/或，
6.根據(jù)權(quán)利要求1-5中任一項(xiàng)所述的三七-蟬擬青霉溶胞產(chǎn)物水提物的制備方法，其特征在于，所述三七-蟬擬青霉菌絲體制備步驟中，所述菌絲體粉末的粒徑為200μm以下；優(yōu)選為177μm以下。
7.根據(jù)權(quán)利要求1-6中任一項(xiàng)所述的三七-蟬擬青霉溶胞產(chǎn)物水提物的制備方法，其特征在于，所述水提物制備步驟中，所述菌絲體粉末與蒸餾水的質(zhì)量比為0.5-2:10，優(yōu)選為1:10；和/或，
8.根據(jù)權(quán)利要求1所述的三七-蟬擬青霉溶胞產(chǎn)物水提物的制備方法，其特征在于，所述水提物制備步驟中，所述離心的條件為3500-5000r/min，8-15min；優(yōu)選為4000r/min，10min。
9.一種三七-蟬擬青霉溶胞產(chǎn)物水提物，根據(jù)權(quán)利要求1-8中任一項(xiàng)所述的制備方法制成。
10.一種三七-蟬擬青霉溶胞產(chǎn)物水提物在制備皮膚外用劑、發(fā)用劑方面的應(yīng)用；優(yōu)選地，所述三七-蟬擬青霉溶胞產(chǎn)物水提物作為所述皮膚外用劑中的抗氧化活性成分和抗炎活性成分中至少一種；優(yōu)選地，所述皮膚外用劑為護(hù)膚水、乳、面霜、面膜中的至少一種。